Screening delle Aneuploidie

Che cos'è la PGD per le aneuploidie?

Lo screening delle aneuploidie riduce al minimo la possibilità che un embrione trasferito presenti un'anomalia cromosomica. Scopri di più riguardo a cromosomi e geni.

Le anomalie cromosomiche più comuni negli aborti spontanei comprendono:

• trisomia (3 copie di un cromosoma) o monosomia (una copia di un cromosoma) per I cromosomi 13, 15, 16, 18, 21 o 22
• triploidia (3 copie di tutti I cromosomi)
• anomalie dei cromosomi sessuali.

È noto che circa 3 embrioni su 4 (75%) creati con la FIVET non sono in grado di generare un bambino vivo. Alcuni non riescono a impiantarsi nell'utero, mentre altri si impiantano ma non sono in grado di portare a termine lo sviluppo embrionale precoce. Infine, come nella gravidanza naturale, circa il 15%-20% dei concepimenti si perde come aborto clinico. Sebbene le ragioni per cui un embrione non riesce a generare un bambino siano molteplici, il fattore più importante è un'anomalia dei cromosomi.

Allo stesso modo, per la maggior parte delle coppie, un numero significativo di embrioni creati con la FIVET presenterà anomalie cromosomiche. L'esatta percentuale di embrioni con anomalie cromosomiche che ogni coppia produce è legata a molti fattori, tra cui l'età materna, il numero di cicli di FIVET falliti e il tipo di sperma utilizzato. Inoltre, una certa percentuale di anomalie è dovuta al fatto che la FIVET non è un processo naturale e l'iperstimolazione delle ovaie produce una maggiore percentuale di ovuli cromosomicamente anormali.

Analisi di Microarray di DNA per il Rilevamento Accurato delle Aneuploidie

Con la tecnica del microarray possiamo esaminare tutti I 24 cromosomi. È un grande miglioramento rispetto a quello che potevamo fare prima. In particolare, prima della tecnologia dei microarray di DNA, potevamo esaminare solo un numero limitato di cromosomi.

Un enorme vantaggio della tecnologia del microarray è che possiamo avere I risultati dell'analisi dei dati del microarray in uno o due giorni, in modo da poter trasferire embrioni freschi invece di un FET (trasferimento di embrioni congelati).

Il test microarray ha aumentato I tassi di nascite vive per ciclo, poiché in ogni ciclo di FIVET può essere individuato un embrione aneuploide.

---

Quando avviene la PGD nel ciclo di FIVET?

Dopo la creazione degli embrioni in laboratorio, questi vengono coltivati per 3 giorni. Il terzo giorno si effettua la biopsia PGD e si prelevano 1 o 2 cellule dall'embrione. Il materiale genetico all'interno di queste cellule viene analizzato per individuare eventuali anomalie. Il giorno 5, la donna torna a EMBIO per discutere I risultati del test PGD. Il nostro team medico la aiuterà a decidere quanti embrioni saranno trasferiti nel suo utero.

La PGD è sicura?

Si. I dati provenienti da molti anni di uso della PGD negli animali e da circa 1200 nascite vive negli esseri umani indicano che la PGD non aumenta I difetti alla nascita o I disordini cromosomici. La PGD viene eseguita prima che il materiale genetico dell'embrione diventi "attivo". Poiché l'intervento viene effettuato così presto, le cellule all'interno dell'embrione sono ancora tutte identiche e ogni cellula è in grado di diventare una qualsiasi parte del bambino. La rimozione di alcune cellule embrionali precoci non altera la capacità dell'embrione di svilupparsi in una gravidanza completa e normale.

Come si estraggono le cellule dall'embrione?

Gli embrioni creati in un ciclo di FIVET vengono coltivati in laboratorio per 3 giorni. A questo punto, contengono circa 8 cellule. Ogni embrione a questo punto è chiamato blastomero. Agli embrioni con sviluppo normale al 3° giorno verranno prelevate una o due cellule da analizzare con una procedura chiamata biopsia. Gli embrioni vengono posti sotto un potente microscopio e strumenti di vetro molto piccoli vengono guidati per praticare una piccola incisione nella zona pellucida (una membrana esterna resistente che tiene insieme l'embrione). A seconda della salute e delle dimensioni dell'embrione, vengono prelevate una o due cellule. L'incisione si chiude a scatto e nessuna cellula può "cadere" accidentalmente.

Per ottenere I risultati della biopsia, le 1-2 cellule prelevate devono contenere un nucleo, poiché il nucleo contiene le informazioni genetiche necessarie per il test. Se la cellula prelevata è priva di nucleo o se il nucleo si rompe durante la preparazione, il test non può essere eseguito su quella cellula. Inoltre, poiché gli embrioni crescono e si dividono attivamente, a volte la cellula prelevata contiene due nuclei. Ciò potrebbe significare che la cellula è anormale o è bloccata nel processo di divisione. L'analisi di queste cellule può essere difficile da interpretare.

Come si svolge esattamente il test PGD?

Il test PGD si differenzia dalla maggior parte dei test genetici poiché viene eseguito solo su una o due cellule embrionali e deve essere completato entro 48 ore per consentire il trasferimento dell'embrione entro il 5° giorno. Poiché l'analisi cromosomica standard richiede diversi giorni, viene eseguito un metodo diverso chiamato ibridazione in situ a fluorescenza (FISH).

Ogni cromosoma ha aree uniche di DNA presenti solo su quel cromosoma. Una piccola sonda di DNA viene utilizzata per riconoscere questi modelli unici e si illumina quando si attacca al cromosoma. Ogni sonda emette una luce di colore diverso, consentendo di analizzare contemporaneamente più cromosomi. Questa tecnica è chiamata FISH. EMBIO utilizza la FISH per I cromosomi 13, 15, 16, 18, 21, 22, X e Y perché questi sono I cromosomi più comunemente anormali. Una cellula normale dovrebbe mostrare 2 segnali FISH (o luci) per ciascun cromosoma numerato, e 2 segnali X per una femmina o 1 segnale X e 1 Y per un maschio. È possibile utilizzare solo cinque colori diversi, quindi la maggior parte dei test viene eseguita in due parti. Vengono analizzati I primi 5 cromosomi, le sonde vengono lavate via e vengono analizzati I cromosomi rimanenti. Il processo di lavaggio può influenzare l'integrità di ciascun cromosoma; pertanto, per ogni cellula vengono utilizzati al massimo due cicli di FISH. Per questo motivo, non è possibile analizzare tutti I cromosomi.

Colore /	Cromosoma
Rosso =	13
Aqua =	16
Blu =	18
Verde =	21
Oro =	22

Esempio di un normale test di aneuploidia FISH che mostra due copie di ciascuno dei cromosomi analizzati:

Come vengono scelti gli embrioni da trasferire?

Gli embrioni che presentano un risultato e un aspetto normali devono essere trasferiti. A volte gli embrioni che hanno test genetici normali presentano un problema fisico che impedisce loro di crescere normalmente. A volte gli embrioni che presentano test genetici anormali appaiono fisicamente normali. La combinazione di test genetici normali e di un aspetto fisico normale indica la massima probabilità di avere una gravidanza sana.

Quali caratteristiche fisiche vengono utilizzate per determinare l'aspetto normale?

Gli embriologi assegnano un "punteggio" all'embrione in base alle dimensioni uniformi delle diverse cellule, al numero di frammenti cellulari presenti e ad altri criteri che riflettono l'aspetto fisico dell'embrione. Gli embrioni che non hanno almeno 5 cellule al terzo giorno o quelli a cui viene assegnato un punteggio insufficiente raramente vanno incontro a un impianto di successo. Sebbene la morfologia dell'embrione aiuti a scegliere gli embrioni migliori per il trasferimento, è noto che molti embrioni con anomalie cromosomiche significative hanno una morfologia normale. Anche tra gli embrioni che raggiungono con successo uno stadio di sviluppo avanzato (blastocisti), il 25% presenta ancora anomalie cromosomiche! Insieme alla morfologia dell'embrione, lo screening delle aneuploidie aiuta a selezionare gli embrioni migliori da trasferire in un ciclo di FIVET.

Cosa succede se non vengono utilizzati tutti gli embrioni sani?

Tutte le decisioni su quali embrioni trasferire e su come utilizzare gli embrioni rimanenti saranno prese insieme alla coppia e al suo medico.

Per fissare un appuntamento per una prima consultazione con uno dei nostri specialisti della riproduzione, chiama il numero +30 2106774104.

Per ulteriori informazioni sulla PGD per le aneuploidie dell'Istituto di Genetica e FIVET, chiama il numero +30 2106774104 e chiedi di parlare con il consulente PGD o invia un'e-mail al dottor Paraschos.

Cariogramma, un test genetico rivoluzionario

Gli scienziati hanno sviluppato un test rivoluzionario che permetterà ai futuri genitori di testare I loro embrioni per quasi tutte le malattie genetiche conosciute. Il Cariogramma si basa sulla stessa procedura della PGD (lo ha sviluppato lo stesso medico). Tuttavia, è in grado di rilevare tutte le malattie genetiche conosciute negli embrioni entro poche settimane (le uniche eccezioni sono quelle che compaiono improvvisamente a causa di una mutazione accidentale).

Cosa vorresti chiedere al nostro specialista in PGD?

Le seguenti domande possono aiutarti a esporre il tuo problema allo specialista in PGD di EmBIO.

• Sei una donna sopra I 35 anni?
• Ha avuto diversi aborti spontanei?
• Ha avuto una precedente gravidanza con un'anomalia cromosomica?
• Ha avuto diversi cicli di FIVET falliti?
• Il concepimento è risultato difficile a causa di un basso numero di spermatozoi?
• Tu o il tuo partner siete portatori di un riarrangiamento cromosomico strutturale bilanciato?
• Hai un passato familiare di malattia di Huntington?
• Tu o il tuo partner siete portatori di una malattia genetica recessiva come la fibrosi cistica?
• Tu o il tuo partner siete portatori di una malattia genetica legata al cromosoma X, come l'emofilia o la Distrofia Muscolare di Duchenne?
• Desideri bilanciare I sessi nella tua famiglia (selezionare il sesso dell'embrione)?